Tècniques

Bioquímica

• Separació de lipoproteïnes per ultracentrifugació seqüencial (Kontron).
• Determinació de biomarcadors sanguinis per autoanalitzador (Cobas Mira Plus): perfil lipídic, proteïnes...
• Determinació de α-tocoferol i retinol per HPLC (Hewlett Packard, 1050 amb detector de UV/visible i fluorescència).
• Quantificació d’aldehids apolars per HPLC (Hewlett Packard, 1050 amb detector de UV/visible i fluorescència).
• Quantificació d’aldehids totals per TLC.
• Determinació de la susceptibilitat a l’oxidació de les lipoproteïnes per espectrofotometria (Uvikon 922, Kontron).
• ELISAs: TNF-a, FABP4, ApoH, E-selectina, VCAM-1, ICAM-1, ox-LDL, Ab-oxLDL...

Cultius cel·lulars

• Optimització i manteniment de cultius primaris i línies cel·lulars establertes.
• Cultius primaris: fibroblasts, monòcits, HUVEC, HAEC, VSMC...
• Línies cel·lulars: THP-1, HEPG2, Jurkat, 3T3L1...
• Congelació i descongelació de cèl·lules.
• Emmagatzament de cèl·lules en nitrogen líquid.
• Comptatge de cèl·lules amb càmara de Neubauer (microscopi Olympus invertit i de contrast de fases).
• Determinació de la viabilitat cel·lular amb Trypan blue, LDH, Hoechst.
• Detecció de micoplasmes en cultius cel·lulars per PCR.
• Tincions cel·lulars específiques: Oil Red, ORO...
• Assaig d’adhesió cel·lular.

Biologia cel·lular

• Obtenció d’extractes de proteïnes nuclears cel·lulars.
• Obtenció de lisats cel·lulars.
• Determinació de proteïnes per Lowry, Bradford.
• Separació de proteïnes per electroforesi amb gels de poliacrilamida (SDS-PAGE ...) i tinció amb nitrat de plata, coomassie blue (Protean II, BioRad; X Cell SureLock Mini Cell, Invitrogen; Multiphor II System, Amersham Biosciences; Hoefer SE 260, Amersham Bioscience).
• Determinació de proteïnes per western blot: XCell Blot Module (Invitrogen) Trans-Blot SD Semi-Dry Transfer Cell (BioRad).
• Immunoprecipitació.

Biologia molecular

• Aïllament de RNA total a partir de teixits i cèl·lules.
• Síntesi de cDNA. Transcripció inversa (RT).
• Arrays d'expressió gènica (en col·laboració amb Empresa externa).
• Amplificació de DNA per PCR.
• Electroforesi amb gels de poliacrilamida i tinció amb nitrat de plata, Sybr-Safe.
• Electroforesi amb gels d’agarosa i tinció amb Sybr-Safe.
• Electromobiliy shift assay (EMSA).
• Clonació de promotors en vectors.
• Mutagènesi dirigida.
• Transfeccions cel·lulars.
• Assaig de la luciferasa.